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鬼峰去除柱芯

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一、?概述

鬼峰是液相色譜中最常出現(xiàn)的問題之一,在做液相色譜反相系統(tǒng)梯度分析時(shí),有時(shí)會(huì)遇到儀器不進(jìn)樣,也有出峰的情況;同樣的條件,有時(shí)出現(xiàn)異常色譜峰,這種峰神出鬼沒,變幻莫測,所以被稱為鬼峰。

?圖片1

鬼峰來源多種多樣,其主要來源可分為以下2個(gè)方面:

(1)流動(dòng)相、樣品稀釋液、儀器或是容器中存在雜質(zhì),當(dāng)梯度開始時(shí)由于有機(jī)相比例不高,洗脫能力不強(qiáng),雜質(zhì)在色譜柱柱頭富集,隨著流動(dòng)相比例變化,洗脫能力增強(qiáng),富集的雜質(zhì)被洗脫,從而形成鬼峰。

(2)流動(dòng)相脫氣不完全,殘留氣泡??諝庠谟袡C(jī)相和水中的溶解度不同,當(dāng)水和有機(jī)相混合時(shí),氣泡就產(chǎn)生了。

鬼峰的危害:

1、污染儀器

2、對(duì)樣品成分誤判斷

3、與目標(biāo)峰重疊,影響分離度

4、增加工作量要做更多的驗(yàn)證工作去判定這個(gè)物質(zhì)是否是目標(biāo)物質(zhì)

反相色譜梯度分析時(shí),使用恒譜生鬼峰捕集柱能夠去除溶劑包括有機(jī)溶劑中的雜質(zhì),對(duì)弱極性和非極性的有機(jī)雜質(zhì)有強(qiáng)烈吸附,有效的消除污染物,減少鬼峰出現(xiàn)的幾率,延長色譜柱和儀器的壽命。

二、?鬼峰搜集去除柱的安裝

鬼峰捕集去除柱保存在純甲醇中,使用前采用純甲醇1ml/min流速?zèng)_洗20min(注意:不要連接色譜柱和檢測器進(jìn)行沖洗),沖洗好后卸下小柱,按照示意圖安裝位置,連接到混合器與進(jìn)樣器之間。(安裝時(shí)注意進(jìn)出方向)

圖片2

下面實(shí)例表明,將恒譜生鬼峰去除小柱安裝在混合器之后可以有效捕集流動(dòng)相引進(jìn)的雜質(zhì)。

色譜條件:

色譜柱:USHA-?C18 4.6*250mm 5um

流速:1.0ml/min?????進(jìn)樣量:20ul????柱溫:40度????檢測波長:210nm

樣品:高純水????流動(dòng)相A:高純水????流動(dòng)相B:乙腈

運(yùn)行梯度:

時(shí)間(min)

流動(dòng)相A(%)

流動(dòng)相B(%)

0

90

10

20

10

90

30

10

90

使用前使用前

使用后使用后

 

 

 

 

鬼峰來源:

1.儀器中的雜質(zhì)

2.樣品中的雜質(zhì)

3.流動(dòng)相中的雜質(zhì)

4.進(jìn)樣口稀釋液與流動(dòng)相極性/PH相差太大

5.流動(dòng)相殘留氣泡

6.儀器系統(tǒng)時(shí)間較久

 

其中主要來源于流動(dòng)相和管路,如:有機(jī)相中污染物,水相中污染物,緩沖鹽,流動(dòng)相瓶和混合過程產(chǎn)生等等。

 

 

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